Mycoplasma Detection Kit (PCR)

Kontaminace mykoplazmaty způsobí nepříznivé účinky na všechny aspekty buněk a stala se vysoce ceněným problémem v buněčných kulturách. Proto je velmi nutné pravidelně detekovat kontaminaci mykoplazmaty. Tato souprava pro detekci mykoplazmat používá metodu PCR ke specifické detekci mykoplazmové kontaminace v různých kultivovaných buněčných biologických materiálech (jako jsou buněčné kultury, sekrety experimentálních zvířat, zvířecí sérum atd.). Smíšené primery použité v soupravě jsou specifické primery navržené pro konzervovanou oblast 16S rRNA sekvence Mycoplasma. Specifická PCR amplifikace Mycoplasma DNA může být dokončena do jedné hodiny s odpovídající Mycoplasma PCR Mix (2×) s použitím roztoku buněčné kultury jako PCR templátu. Tato souprava má vysokou citlivost a dokáže detekovat již 20 kopií mykoplazmat.

Loď s mokrým ledem; Skladováno při -20 stupni, platnost 12 měsíců.

1. Připravte vzorek: Příslušné množství supernatantu buněčné kultury, které má být testováno, bylo odebráno do čisté zkumavky pro PCR. Tyto PCR zkumavky byly tepelně zpracovány při 95 stupních po dobu 5 minut v PCR přístroji a použity jako templát. Vzorky séra mohly být zředěny vodou bez mykoplazmat a příslušné vzorky byly umístěny do čisté zkumavky pro PCR. Tyto PCR zkumavky byly tepelně zpracovány při 95 stupních po dobu 5 minut v PCR přístroji a použity jako templát. ;

2. Připravte reakce PCR: Negativní kontrola (nahraďte 1 μl vzorku stejným množstvím vody bez mykoplazmat) a pozitivní kontrola (přidejte 0,5 μl pozitivní kontroly k 1 μl vzorku jako šablona) každý experiment. Během experimentu používejte jednorázové masky a rukavice a pracujte opatrně, abyste zabránili nesprávnému zavedení exogenní mykoplazmové kontaminace;

3. Nastavení programu PCR:

4. Gelová elektroforéza: Odeberte 10 μl PCR produktu a použijte 1% agarózový gel pro detekci elektroforézou.

5. Analyzujte výsledky: V každém experimentu kontaminace vzorků mykoplazmaty porovnáním s výsledky negativní kontroly a pozitivní kontroly. Velikost pozitivního pásma byla asi 500 bp. Pokud jsou ve výsledcích negativního kontrolního testu proužky, je pravděpodobné, že se jedná o kontaminaci v systému PCR, a doporučuje se výsledky znovu potvrdit. V případě potřeby lze produkty PCR také rutinně sekvenovat, aby se identifikovaly specifické druhy mykoplazmat.

1. Tato souprava dokáže detekovat M. orale,M. arginini, M. bovis, M. fermentans, M. gallisepticum, M. hominis, M. pirum,Ureaplasma spp.,M. hyorhinis, M. pneumoniae, A. laylawii a dalších nejméně 11 druhů mykoplazmové kontaminace.

2. Všechna činidla by měla být před použitím rozmražena a důkladně promíchána na ledu a po použití skladována při teplotě -20 stupňů.

3. Pro každý experiment musí být nastaveny negativní kontroly a pozitivní kontroly a experimentální skupina doporučuje nastavit gradienty šablony vzorků.

4. Během operace musí být nošeny masky a musí být přísně dodržovány provozní standardy PCR, aby se zabránilo vnesení exogenního znečištění ovlivnit výsledky experimentu.

5. Aby byla zajištěna spolehlivost a stabilita buněčných experimentů, doporučuje se pravidelně detekovat mykoplazmovou kontaminaci.

6. Pro vaši bezpečnost a zdraví používejte laboratorní plášť a jednorázové rukavice.

Pouze pro výzkumné účely!

Populární Tagy: detekční sada mykoplazmat（pcr）, čínská detekční sada mykoplazmat（pcr） výrobci, dodavatelé, továrna