2 X Rychlý Pfus PCR Mistr Mix

Tento Fast Pfus PCR Master Mix je připravený k použití PCR premix obsahující modifikovanou Pfu DNA polymerázu, dNTP a optimalizovaný PCR reakční pufr v koncentraci 2× pro rutinní PCR, PCR kolonií, PCR s komplexními templáty a vysoce GC templáty. PCR amplifikace může být provedena přidáním pouze templátu, primerů a ddH2O tak, aby koncentrace roztoku Mix byla 1×. Silná schopnost zesílení, vysoká rychlost zesílení, rychlost rozšíření až 5-15 s/kb, vysoká věrnost, vysoká specificita, produkt zesílení je plochý konec. Do produktu bylo přidáno nakládací barvivo a amplifikovaný produkt lze přímo použít pro detekci elektroforézou na agarózovém gelu.

Loď s mokrým ledem; Skladujte při -20 stupni, platnost 12 měsíců. Vyhněte se opakovanému zmrazování a rozmrazování.

1. Doporučený reakční systém PCR

a: Vyšší množství templátu zvyšuje riziko tvorby nespecifických produktů PCR. Nižší množství templátu snižuje přesnost amplifikace. Pokud je templátem plazmid nebo bakteriofág, doporučuje se přidat 50 ng-5pg v 50 μL rnx. Pokud je tempalovaná genomová DNA, doporučuje se přidat 250 ng-50ng v 50 μL rnx. Pokud je templátem cDNA, nařeďte svou původní cDNA 2-100krát a objem naředěné cDNA přidané do reakce není větší než 10 % celkového reakčního objemu. Pokud je templtae bakteriální tekutina nebo vzorek surového extraktu, objem přidaný do reakce není větší než 10 % celkového reakčního objemu. Vyšší množství templátu má tendenci vést k nespecifické amplifikaci. Nižší množství templátu má tendenci vést k nízké účinnosti amplifikace PCR.

b: Rozsah konečné koncentrace použitého primeru je {{0}}.2-1.0 μM a doporučuje se 0,4 μM. Příliš málo primeru může vést k nízkému nebo žádnému výtěžku amplifikace a příliš mnoho primeru může vést k nespecifické amplifikaci.

c: Pro šablonu s vysokým obsahem GC, DMSO s ne více než 10 % celkového objemu.

2. Doporučené podmínky PCR amplifikace

a: Doba předdenaturace 30 s je vhodná pro většinu běžných šablon; komplexní šablony lze denaturovat až 2 min.

b: Pro amplifikaci komplexních templátů obsahujících zřetězené primery lze dobu nasedání prodloužit až na 30 s.

c: Doporučený krok rozšíření je 5-10 s/kb při 72 stupních pro jednoduché templáty, jako je plazmid, 10-15 s/kb pro rutinní templáty genomové DNA, 15-30 s/kb pro komplexní templáty .

1. Při použití prosím rozmrazte a důkladně promíchejte, po úplném rozmrazení lze umístit do stabilního skladu při 4 stupních nejméně 2 týdny, vyhněte se opakovanému zmrazování a rozmrazování.

2. Pro vaši bezpečnost a zdraví používejte ochranné brýle, rukavice nebo ochranný oděv.

Pouze pro výzkumné použití!

Populární Tagy: 2 x fast pfus pcr master mix, Čína 2 x fast pfus pcr master mix výrobci, dodavatelé, továrna