IF750-tyramid

Amplifikace tyramidového signálu (TSA) je typ enzymatické detekční metody, která využívá HRP k provádění in-situ značení cílových antigenů s vysokou hustotou a lze ji použít k amplifikaci signálu IF/IHC. Hlavní principy technologie TSA: V přítomnosti peroxidu vodíku H2O2 může křenová peroxidáza HRP katalyzovat tyramin jako velmi aktivní meziprodukt s krátkou životností. Během krátké doby se meziprodukt může kovalentně vázat na elektrony bohatý povrch okolních proteinů za vzniku tyraminového komplexu a velké množství bohatých shluků, jako je „ostrov“, je integrováno s enzymem jako centrem. Velké množství luciferinu bylo uloženo na vazebném místě antigen-protilátka, aby se dosáhlo amplifikace signálu.

Technika TSA může být použita k detekci cílů s nízkou abundancí, které nelze detekovat konvenčními metodami. Technologie amplifikace signálu založená na tyraminu může poskytnout extrémně vysokou citlivost a detekovat velmi malá množství cílových antigenů. Technologie TSA výrazně snižuje množství protilátek a šetří protilátky a lze ji použít v kombinaci s konvenčními metodami barvení pro vícebarevné zobrazování nebo lze postupně provést dvě nebo více tyraminových reakcí pro označení různých cílů na vzorku, takže vícenásobné fluorescenční barvení lze dosáhnout opakovaným značením různých fluorescenčních tyraminů

Podmínky skladování a manipulace

Vlhké ledové balíčky pro přepravu skladujte při teplotě -20 stupňů po dobu 12 měsíců.

Poznámka:

1. Po roztavení při pokojové teplotě se zkumavka před použitím krátce odstředí.

2. V porovnání s fluorescenční sekundární protilátkou má TSA kit vyšší citlivost a silnější signál. Koncentrace primární protilátky by proto měla být snížena, obecně expandující 5-10krát na základě poměru ředění doporučeného v manuálu k protilátkám, aby se snížila fluorescence pozadí způsobená nespecifickou vazbou. Pro dosažení nejlepších výsledků se doporučuje nastavit koncentraci gradientu odporu.

3. Pokud je fluorescence pozadí silná, doporučuje se zvýšit stupeň zhášení tkáňové autofluorescence.

4. Doporučený poměr ředění fluorescenčního tyramidu je 1:500 a poměr ředění lze upravit podle experimentálních výsledků (doporučený rozsah poměru ředění je 1:200-1:1000).

5. Ředidlo byste si měli připravit sami, 1×TBST (doporučeno G0004) obsahující 0,003 % H2O2. 1×TBST (doporučeno G0004) 100 ml, přidejte 100 μl 3% H2O2, dobře promíchejte. Ředidlo snadno selže, proto se doporučuje použít jej nyní.

6. Pokud se provádí vícenásobné fluorescenční značení, doporučuje se inkubovat nejprve polyklonální protilátky a poté monoklonální protilátky. Nejprve se inkubuje protilátka odpovídající vysoce zastoupenému cílovému proteinu a poté se inkubuje protilátka odpovídající nízko zastoupenému cílovému proteinu. Konkrétní provozní kroky naleznete v naší TSAPLus fluorescenční multi-label (1-7 štítky, 2-8 barevná fluorescence) barvicí sadě (G1226, G1236, G1255, G1256, G1257, G1259).

7. Během provozu používejte laboratorní plášť a jednorázové rukavice.

8. Podle mapy světelného zdroje fluorescenčního zobrazovacího systému lze vybrat různé kombinace fluorescenčních barviv pro provádění vícenásobného značení fluorescence TSA.

Pouze pro výzkumné použití!

Populární Tagy: if750-tyramid, Čína if{1}}výrobci tyramidu, dodavatelé, továrna