Rostlinná kapalina pro barvení peroxidem vodíku (DAB)

Rostlinné tkáně produkují za stresových podmínek různé reaktivní formy kyslíku (ROS). Aktivita ROS je velmi velká a extrémně nestabilní, takže detekce ROS obvykle závisí na jeho finálních produktech. Peroxid vodíku je typ reaktivní formy kyslíku. Peroxid vodíku, katalyzovaný katalázou, může rychle reagovat s DAB (3, 3-diaminobenzidintetrahydrochlorid) za vzniku hnědočervené sloučeniny, aby se peroxid vodíku nacházel ve tkáních. Podle základního principu se také nazývá metoda DAB. Na základě výše uvedeného principu se tento produkt používá k barvení peroxidem vodíku v živých tkáních rostlin. Obecně se aplikuje na citlivé kořenové špičky, listy a další celkové barvení, po obarvení je místo akumulace peroxidu vodíku hnědé až tmavě hnědé.

Přeprava mokrého ledu; Skladujte při 2-8 stupni, platnost 12 měsíců.

1. Příprava činidla: 100 mg DAB bylo zcela rozpuštěno ve 100 ml fosfátového pufru, aby se získal pracovní roztok pro barvení DAB, který byl skladován při 4 stupních pod světlem a účinný během jednoho týdne. Poznámka: DAB je citlivý na světlo a musí být během procesu rozpouštění chráněn před světlem. Pokud se obtížně rozpouští, lze rozpouštění podpořit ultrazvukovým a magnetickým mícháním.

2. Sesbírejte sazenice nebo kořenové špičky rostlin ve stresu (např. těžké kovy), mírně je omyjte čistou vodou a položte na filtrační papír, aby se přebytečná voda vypustila. Sazenice rostlin nebo kořenové špičky byly ponořeny do DAB barvícího pracovního roztoku při pokojové teplotě a drženy mimo světlo po dobu 2-6 h, dokud se pozitivní část nezdála tmavě hnědá a zbývající části byly téměř bezbarvé nebo nevykazovaly barvu rostliny sám. (Dobu barvení upravte podle stupně mládí a barevného vývoje rostlin)

3. Pinzetou opatrně vyjměte sazenice nebo listy rostlin, ponořte je do čisté vody a 3-5krát je opláchněte tam a zpět, položte je na filtrační papír, abyste vysali přebytečnou vodu, a poté je ponořte do 95% etanolu při 40 stupních po dobu 3-16 h. Účelem je odstranit chlorofyl ze samotných rostlinných sazenic nebo listů a čerstvý 95% etanol lze při odbarvování mnohokrát vyměnit.

4. Pinzetou vyjměte sazenice nebo listy, ponořte je do čisté vody a 3-5krát je opláchněte tam a zpět, položte je na filtrační papír, aby se vysála přebytečná voda, přeneste vzorky do vhodného množství vzorku DAB konzervační roztok a namočte je na 30 minut, poté vyfotografujte. Vzorky mohou být skladovány v roztoku při pokojové teplotě po dobu jednoho týdne.

1. Po přípravě pracovního roztoku pro barvení DAB by měl být skladován při 4 stupních a chráněn před světlem a spotřebován do jednoho týdne. Doba skladování je příliš dlouhá, ovlivní barvu.

2. Protože se peroxid vodíku snadno rozkládá a jakékoli vnější faktory mohou stimulovat stres rostlin k produkci peroxidu vodíku, je třeba vzorky rostlin odebrat čerstvé a co nejdříve je obarvit. Doporučuje se negativní a pozitivní slepá kontrolní skupina.

3. Vyfoťte co nejdříve, abyste uložili výsledky po barvení vzorku.

4. Během provozu používejte laboratorní plášť a jednorázové rukavice.

Pouze pro výzkumné použití!

Populární Tagy: kapalina pro barvení rostlin peroxidem vodíku (dab), Čína rostlina kapalina pro barvení peroxidem vodíku (dab) výrobci, dodavatelé, továrna