ATP Luminescence Cell Viability Assay Kit

 

Název produktu	Kočka. Žádný.	Spec.
ATP Luminescence Cell Viability Assay Kit	G1612-100T	10 ml
	G1612-1000T	100 ml

 

 

ATP je důležitá energetická molekula v buňce, která hraje důležitou roli v různých fyziologických a biochemických činnostech buňky a je známá jako energetická měna v organismu. Buněčný stav a počet buněk ukazují korelaci s ATP. Proto lze počet buněk nebo životaschopnost hodnotit pomocí relativní hladiny ATP.

Tato souprava je založena na principu ATP-dependentní luciferázy katalyzující luciferin za vzniku fluorescence, která dokáže účinně detekovat a vyhodnocovat intracelulární hladinu ATP. Ve srovnání s tradičními metodami, jako jsou CCK{1}} a MTT, má fluorescenční metoda výhody vysoké citlivosti a širokého rozsahu.

 

 

Loď se suchým ledem; Skladujte při teplotě -80 stupňů mimo dosah světla po dobu 12 měsíců; Skladujte při -20 stupních od světla, doporučeno spotřebovat do 6 měsíců.

 

 

Komponent	G1612-100T	G1612-1000T
ATP Luminescence Cell Viability Assay Kit	10 ml	100 ml
Manuál	1 ks

 

 

1. Předzpracování buněk:Naočkujte buňky v určité hustotě do 96-jamkové destičky (vyberte prosím bílou neprůhlednou destičku s jamkami vhodnou pro buněčnou kulturu nebo použijte běžnou destičku pro buněčné kultury. Při provádění detekce přeneste roztok do bílých detekčních jamek, abyste minimalizovat interferenci mezi sousedními jamkami.) a předem ošetřit buňky podle účelu experimentu;

2. Příprava vzorků pro standardy ATP (volitelné):Standard ATP (samostatný) se postupně zředí pufrem, jako je PBS nebo bazální médium a přidá se do destičky s jamkami v množství 100 ul/jamku;

3. Test buněčné životaschopnosti:

3.1. Vyjměte ATP Luminescence Cell Viability Assay Reagent předem, rozmrazte jej a vraťte na pokojovou teplotu;

3.2. Vyjměte destičku s buněčnou kulturou a nechte ji ekvilibrovat při pokojové teplotě po dobu 5-10 min;

3.3. ATP Luminescence Cell Viability Assay Reagent se přidá přímo do jamkové destičky v množství 100 ul/jamku;

3.4. Protřepejte vodorovně po dobu 1-2 min nebo promíchejte klepnutím;

3.5. Po 3 min stání lze chemiluminiscenční test provést pomocí Luminometru, multifunkčního enzymového označovače s chemiluminiscenčním detekčním modulem nebo jiných přístrojů schopných detekovat bioluminiscenci (poznámka: vzorek samotný při fluorescenční metodě nevyzařuje světlo, ale potřebuje být excitován specifickou vlnovou délkou excitačního světla a poté přijat speciálním kanálem. Při chemiluminiscenci samotný vzorek emituje světlo a nemusí být excitován specifickou vlnovou délkou excitační světlo, aby bylo detekováno odpovídajícím zařízením);

4. Analýza dat:Následující analýza dat je založena na odečtení prázdného pozadí

4.1. Analýza relativního počtu buněk (proliferace): Podle hodnoty intenzity fluorescence určete počet buněk.

4.2. Výpočet viability buněk (životaschopnost buněčné proliferace nebo životaschopnost cytotoxicity):

Poznámka:

A (dávkovaná skupina): ošetřené buňky + ATP luminiscenční činidlo pro test životaschopnosti buněk

A1 (žádná dávková skupina): normální neošetřené buňky + reagencie testu životaschopnosti buněk ATP luminiscence

A0 (slepá kontrolní skupina): médium pro kultivaci buněk (žádné buňky) + činidlo pro test životaschopnosti buněk luminiscence ATP

4.3. Kvantitativní analýza obsahu ATP (volitelné):

4.3.1. Hodnota intenzity fluorescence detekované standardní křivky ATP se odečte od dat hodnoty intenzity fluorescence slepé kontrolní skupiny a standardní křivka se vynese pomocí softwaru, jako je Excel, a získá se vzorec:

kde a představuje sklon ab představuje průsečík.

4.3.2. Hodnota X (obsah ATP) v testovacím systému se vypočítá podle vzorce:

Vypočítejte hodnotu Y dosazením sklonu a a průsečíku b z 4.3.1 do výše uvedené rovnice.

4.3.3. Výpočet obsahu ATP ve vzorcích:

 

1. Pro zajištění efektivního použití testovacího činidla se doporučuje skladovat v malých dávkách a vyhnout se opakovanému zmrazování a rozmrazování.

2. Časová odchylka testování je řízena během 5-30 min, aby byla zajištěna přesnost testovacích dat.

3. Část vysráženého činidla po rozmrazení je normálním jevem, před použitím zcela protřepejte, aby bylo zajištěno jeho úplné rozpuštění.

4. Snažte se vyhnout světlu a přidejte testovací činidla během krátké doby. Pro přidávání vzorků se doporučuje použít vícejamkovou pipetu a věnovat pozornost konzistenci pipetovaného objemu v každé jamce pipety.

5. Pro své zdraví a bezpečnost noste během provozu laboratorní plášť a rukavice.

 

Pouze pro výzkumné použití!

 

 

Populární Tagy: souprava pro test životaschopnosti luminiscenčních buněk atp, Čína výrobci souprav pro test životaschopnosti luminiscenčních buněk atp, dodavatelé, továrna