Fluorescenční souprava pro lipidové kapky

 

Název produktu	Kočka. Žádný.	Specifikace.
Fluorescenční souprava pro lipidové kapky	G1905-100T	100 T

 

 

Lipidové kapénky jsou specializované lipidové zásobní organely v buňkách, které mohou regulovat ukládání a hydrolýzu neutrálních lipidů v buňkách a poskytují buňkám dynamickou energetickou rovnováhu. Kromě toho se lipidové kapénky mohou pohybovat podél cytoskeletu a interagovat s jinými organelami, což hraje důležitou roli v regulaci přenosu signálu. Abnormální akumulace buněčných lipidových kapének se vyskytuje u několika typů metabolických onemocnění, jako je obezita, ztučnění jater, kardiovaskulární onemocnění a patologické stavy.

Fluorescenční souprava pro lipidové kapky je založena na BODIPY 493/503, což je lipofilní fluorescenční sonda schopná lokalizace do polárních lipidů a lze ji použít ke kalibraci obsahu neutrálních lipidů v buňkách a tkáních. Tato souprava byla optimalizována a odladěna našimi R&D team, a má řadu výhod, jako je snadné použití, stabilní výkon a dobrá reprodukovatelnost atd. Čím vyšší je obsah intracelulárních lipidů, tím silnější intenzita generované fluorescence, kterou lze detekovat fluorescenčním mikroskopem a průtokovým cytometrem. Kromě toho tato souprava navíc poskytuje kyselinu olejovou jako induktor syntézy a skladování triglyceridů, kterou lze použít pro indukci pozitivní kontroly.

 

 

Loď se suchým ledem; Skladujte při teplotě -20 stupňů mimo světlo po dobu 6 měsíců.

 

 

Číslo součásti	Komponent	G1904-100T
G1905-1	Sonda pro analýzu lipidových kapiček (2 mM)	100 μL
G1905-2	Testovací pufr pro lipidové kapky	100 ml
G1905-3	Pozitivní induktor (500 mM)	50 μL
Manuál		1 ks

 

Poznámka: Výše ​​uvedené reakční časy jsou testovány pro systém 6-jamkových destiček.

 

 

Poznámka: Vezměme si jako příklad 6-přilnavé buňky na jamkové destičce, suspenzní buňky je třeba centrifugovat při každé výměně kapaliny; Vzorky tkání přímo odkazují na kroky barvení a značení a celkový objem použitých činidel se upravuje podle situace; V případě potřeby lze vzorky předem fixovat, ale vyhněte se perforaci vzorků.

1. Příprava pracovního roztoku pro test lipidových kapiček a pracovního roztoku pro indukci lipidových kapiček:

1.1. Vezměte vhodné množství testovací sondy lipidových kapiček (2 mM) a testovacího pufru lipidových kapiček, důkladně promíchejte v poměru 1 : 500-2000 a připravte pracovní roztok pro test lipidových kapiček;

1.2. Vezměte vhodné množství pozitivního induktoru (500 mM) a použijte buněčné kultivační médium odpovídajících testovacích buněk k jeho zředění na 400-1000 uM a připravte pracovní roztok pro indukci lipidových kapek pro náhradní použití (tato koncentrace je referenční rozsah a lze jej vhodně upravit podle povahy buněk nebo jiných okolností).

2. Pozitivní kontrolní skupina a léková a jiná ošetření (6-adherentní buňky na jamkové destičce, například suspenze buněk při každé změně kapaliny, proveďte prosím centrifugaci):

2.1. Buňky se podle potřeby předem vysadí do 6-jamkových destiček (s nebo bez prolézačky v závislosti na testu a vybavení);

2.2. Odstraňte původní buněčné kultivační médium a promyjte dvakrát PBS nebo jinými pufry;

2.2.1. Experimentální skupina: buňky, které mají být testovány, jsou podrobeny stimulaci léčivy nebo jiné relevantní léčbě a požadovanou dobu inkubace si nastavíte sami;

2.2.2. Pozitivní kontrolní skupina: 1 ml pracovního roztoku pro indukci lipidových kapek se přidá do jamkové destičky, která se umístí do inkubátoru pro inkubaci přes noc;

2.3. Na konci inkubace přejděte ke kroku 3 pro označení skvrn.

3. Značka barvení lipidových kapiček:

3.1. Odstraňte celogenní médium a promyjte 2-3krát PBS nebo jinými pufry;

3.2. Odstraňte promývací pufr, přidejte 1 ml pracovního roztoku pro lipidový kapkový test a promíchejte za mírného třepání;

3.3. Inkubujte 15 minut v CO2 inkubátoru chráněném před světlem;

3.4. Po inkubaci jej dvakrát promyjte PBS nebo jinými pufry a lze jej dále barvit jádry a dalšími operacemi nebo detekovat pomocí vhodného zařízení podle potřeby experimentu;

4. Detekce lipidových kapiček:

4.1. Vzorek po inkubaci a promytí v 3.4 je analyzován pomocí vhodné metody a přístrojového vybavení, označen tak, aby vykazoval zelenou fluorescenci, EX/EM 493/503 nm, a některé příklady instrumentální detekce jsou uvedeny níže;

4.1.1. Přímo nebo pomocí antifluorescenčního zhášecího uzavíracího roztoku (položka č. G1401) se film uzavře a poté se umístí pod fluorescenční mikroskop pro detekci a analýzu.

4.1.2. Po štěpení a resuspendování pomocí tryptického štěpení (suspenzní buňky se nepoužívají) jsou buňky detekovány a analyzovány pomocí průtokové cytometrie.

 

 

1. Vzhledem k různým typům a vlastnostem buněk lze koncentraci pozitivních induktorů a sond a inkubační dobu vhodně upravit podle potřeb experimentu.

2. Vzorky by se měly vyhýbat kontaktu s organickými rozpouštědly nebo jinými složkami, které ovlivňují lipidy, aby nedošlo k narušení přesnosti testu.

3. Fluorescenční barviva podléhají zhášení a proces by měl být chráněn před světlem.

4. Pro své zdraví a bezpečnost noste během provozu laboratorní plášť a rukavice.

 

Pouze pro výzkumné použití!

 

 

Populární Tagy: Sada fluorescenčních testů lipidových kapiček, Čína výrobců fluorescenčních testů lipidových kapiček, dodavatelé, továrna