Barvicí roztok Hoechst 33258 (připravený k použití)

Molekulární vzorec Hoechst 33258 je C25H24N6O·3HCl, molekulová hmotnost je 533,88 a číslo CAS je 23491-45-4. Hoechst 33258 je modré fluorescenční barvivo, které může pronikat buněčnou membránou a jeho fluorescence je výrazně zesílena v kombinaci s dvouvláknovou DNA. Maximální vlnová délka excitace je 346 nm a maximální vlnová délka emise je 460 nm. Hoechst 33258 se běžně používá pro detekci apoptózy, jaderné barvení nebo rutinní barvení DNA. Lze jej použít k barvení jader fixovaných buněk a tkání nebo nefixovaných buněk a tkání. Po obarvení jej lze pozorovat fluorescenčním mikroskopem nebo detekovat průtokovou cytometrií. Při pozorování fluorescenčním mikroskopem je excitován ultrafialovým světlem, což je modrá fluorescence.

Tento produkt je roztok připravený k použití, jehož koncentrace je optimalizována tak, aby vyhovovala potřebám všech druhů rutinního barvení.

Přeprava mokrého ledu; Skladujte při teplotě 2-8 stupňů mimo dosah světla, platnost 6 měsíců.

1. Pro fixované buněčné nebo tkáňové řezy:

A. U vzorků fixovaných buněk nebo tkání po fixaci odstraňte fixační roztok a promyjte PBS nebo jiným vhodným pufrem 2-3krát, pokaždé 3-5 min (pro detekci suspendovaných buněk postupujte podle rutiny provozní metoda suspendovaných buněk a centrifugace a další kroky musí být přidány do všech experimentů);

b. (Volitelný krok) Pokud je třeba fixované buňky nebo tkáně ošetřit imunofluorescenčním barvením, měla by být nejprve provedena příslušná léčba a po ošetření by mělo být provedeno barvení Hoechst 33258;

C. Přímo odeberte vhodné množství roztoku barviva Hoechst 33258 produktu (typ pro okamžité použití) k pokrytí vzorku a inkubujte při pokojové teplotě asi 5 minut ve tmě;

d. Odstraňte roztok barviva a promyjte jej PBS nebo jiným vhodným pufrem 2-3krát, pokaždé 3-5 min;

E. Po utěsnění destiček nebo přímo pod fluorescenčním mikroskopem byla vlnová délka excitace 350 nm a vlnová délka emise byla 460 nm.

2. Pro živé buňky nebo kultivované tkáně:

A. Přidejte do buněčné kultury vhodné množství roztoku barviva Hoechst 33258 (typ připravený k použití), aby zcela pokryl vzorek, který má být barven; obecně platí, že 1 ml barvícího roztoku by měl být přidán do jamky 6-jamkové destičky a 100 μl barvícího roztoku by mělo být přidáno do jamky 96-jamkové destičky. Vzorky byly inkubovány po dobu 10-20 min v inkubátoru při 37 stupních.

b. Odstraňte roztok barviva a promyjte jej PBS nebo jiným vhodným pufrem 2-3krát, pokaždé 3-5 min;

C. Přímo pozorováno pod fluorescenčním mikroskopem, vlnová délka excitace byla 350 nm a vlnová délka emise byla 460 nm.

Poznámka:

1. Všechna fluorescenční barviva mají problém zhášení fluorescence. Po barvení se doporučuje fotit co nejdříve. Pro zpomalení zhášení fluorescence lze použít antifluorescenční zhášedlo (doporučeno G1401).

2. Během provozu používejte laboratorní plášť a jednorázové rukavice.

Pouze pro výzkumné použití!

Populární Tagy: barvicí roztok hoechst 33258 (připravený k použití), Čína barvicí roztok hoechst 33258 (připravený k použití), výrobci, dodavatelé, továrna